革兰氏染色试剂盒
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名 称
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规格10ml
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规格100ml
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规格250ml
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规格500ml
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结晶紫
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10ml
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100ml
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250ml
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500ml
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碘 液
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10ml
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100ml
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250ml
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500ml
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95%酒精
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10ml
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100ml
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250ml
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500ml
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蕃 红
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10ml
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100ml
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250ml
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500ml
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革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌细胞壁较厚，肽聚糖网层次较多且交联致密，乙醇脱色时，肽聚糖脱水使孔径缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上，呈紫色。革兰氏阴性菌细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，脱色后类脂外膜迅速溶解，缝隙加大，结晶紫与碘复合物溶出，因此乙醇脱色后再经番红复染，呈红色。
革兰氏染色法
一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是:
1、 取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈(用来大致确定菌液滴的位置)。涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。
2、 涂片:
液体培养基:左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
固体培养基:先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀。
3、 晾干:让涂片在空气中自然干燥。
4、 固定:让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。
5、 染色:将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸铵结晶紫液，染1min。
6、 水洗:用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。
7、 媒染:滴加1滴碘液，染1min，水洗。
8、 脱色:吸去残留水，连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色，立即水洗。
9、 复染:滴加蕃红复染3-5min，水洗。至此，革兰氏染色结束。
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